гематоксилин эозин что это такое простыми словами в медицине

Гематоксилин — эозин

ОКРАСКА ГЕМАТОКСИЛИНОМ — ЭОЗИНОМ

Окраска гематоксилин-эозином — наиболее распространённый метод окрашивания срезов. Этот методпозволяет установить отношения между частями органа, отлично выявляя все клеточные элементы и некоторые неклеточные структуры. Практически во всех случаях независимо от поставленной задачи применяется окраска гематоксилин-эозином. В большинстве случаев для изучения структуры нормального или измененного в результате болезни органа ограничиваются этим методом окраски. В других случаях, когда перед исследователем стоит специальная задача, пользуются особыми методами, окрашивая в то же время параллельно ряд срезов гематоксилин-эозином.

Эта окраска является двойной: гематоксилин — основной краситель — окрашивает ядра клеток, эозин — кислый краситель — красит протоплазму клеток и в меньшей степени — различные неклеточные структуры.

Гематоксилин представляет собой экстракт древесины кампешевого дерева, произрастающего в Америке. Эозин — искусственная краска. Растворы красителей должны быть приготовлены заранее. Гематоксилин сам по себе не является красящим веществом. Для того чтобы приготовить краску, гематоксилин подвергают окислению, в результате чего он превращается в красящее вещество — гематеин. В соединении с некоторыми солями гематеин дает четкое окрашивание ядер (используют гематоксилин Эрлиха, Майера, железный гематоксилин Гейденгайна).

Эозин — протоплазматический краситель; используется он в виде спиртовых или, гораздо чаще, водных растворов. Для приготовления эозина 0,1 г краски растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Подготовка срезов к окраске заключается в их кратковременной обработке спиртом. Поскольку при заливке в парафин или целлоидин материал обезвоживается в спиртах, срезы, полученные при этих способах заливки, в особой подготовке для окраски гематоксилин-эозином не нуждаются. Обрабатывать необходимо замороженные срезы. При этом происходит их обезжиривание и другие изменения в структуре, что значительно улучшает окрашивание гематоксилин-эозином. Срезы обрабатывают в 96° спирте не более 3-5 минут. Из спирта срезы переносят обратно в дистиллированную воду. Окраску производят сначала гематоксилином.

Порядок проведения окраски:

Результат: ядра синие, цитоплазма и межклеточное вещество розовые.

Примеры практических микропрепаратов, окрашенных гематоксилином-эозином:

Рис. 1, 2. Болезнь Фара (феррокальциноз). В веществе головного мозга из зоны подкорковых ядер зональное обызвествление (практически без признаков склероза) стенок небольших сосудов (капилляров, мелких артерий и артериол) различной степени выраженности (от пылевидного включения солей кальция в толще стенки до полного замещения сосудистых стенок кальцинатами). Вдоль стенок большинства капилляров густо расположены небольшие округло-овальные кальцинаты по типу псаммом, вокруг отдельных капилляров образованы целые муфты петрификатов.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х100 и х250.

Рис. 3, 4. Болезнь Фара (феррокальциноз, другое наблюдение). Крупные группы густо расположенных мелких сосудов с наличием циркулярного пылевидного и в виде мелких гранул кальциноза стенок, расположенного между адвентицией сосудов и средней их оболочкой, в толще средней оболочки, полностью замещающего сосудистую стенку. Видны фрагменты сосудистых стенок в косопоперечном, продольном срезе, утолщенные кальцифицированные стенки выглядят как «кусочки вермишели».

Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250.

Рис. 5. Очаговый интрамуральный кардиосклероз. Сохранившиеся кардиомиоциты в состоянии выраженной белковой зернистой дистрофии, выраженной гипертрофии.

Рис. 6. Умеренная-выраженная гипертрофия кардиомиоцитов, белковая зернистая их дистрофия. В цитоплазме ряда кардиомиоцитов вокруг ядер расположены мелкие скопления золотисто-жёлтого «пигмента старения» липофусцина. Очаговая круглоклеточная инфильтрация стромы. Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250.

Рис. 7, 8. Грибковый перикардит (острый гнойно-фибринозный), группа гиалогифомикозов. Очаги выраженной лейкоцитарной инфильтрации с включениями относительно рыхлого фибрина на фоне очагово-диффузных диапедезно-деструктивных кровоизлияний расположены в эпикарде и субэпикардиальной жировой ткани. Здесь же расположены колонии грибковой микрофлоры, относящейся к гиалогифомикозам: хорошо окрашены гематоксилином-эозином, гифы в диаметре около 2-3 мкм, разрастаются пучками от центрального фокуса в виде «кустарника». Некоторые гифы дихотомично делятся. Мицелий септированный.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Рис. 9, 10. Метастазы плоскоклеточного рака в миокард, субэпикардиальную жировую ткань. Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Рис. 11. Актиномикоз лёгкого с перифокальной картиной очаговой острой гнойной пневмонии.

Окраска: гематоксилин и эозин.

Рис. 12. Лёгочная миграция личинки аскариды. В просвете альвеолы червеобразная структура розового цвета, свёрнутая в клубок, с признаками её движения (тонкие перифокальные полоски просветления в реактивном гнойном экссудате).

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Рис. 13-15. Грибковая (кандидозная) пневмония. Лёгочная ткань разрушена за счёт выраженного разрастания древовидного мицелия с перифокальной острой гнойно-фибринозной пневмонией. В отдельных полях зрения видны спорангии со спорами.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Препараты предоставлены кафедрой судебной медицины Ижевской ГМА, Свердловским ОБСМЭ.

Рис. 16, 17. Грибковая (кандидозная) пневмония. Лёгочная ткань разрушена за счёт выраженного разрастания мицелия с большим количеством спороносцев.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х100 и х250.

Рис. 18. Криптококкоз лёгкого.

Окраска: гематоксилин и эозин.

Рис. 19. Криптококкоз печени.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Рис. 20, 21. Печень. Очаговое острое гнойное межуточное воспаление с преобладанием эозинофилов. Очаговое выраженное полнокровие синусоидных капилляров и центральных вен с эритростазами, диапедезными микрогеморрагиями. Гепатоциты в состоянии выраженной белковой зернистой дистрофии, мелко — и крупнокапельной жировой дистрофии. Часть печёночных клеток в состоянии некробиоза-некроза.

Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250.

Рис. 22. Выраженная очаговая гидропическая дистрофия гепатоцитов, сочетающаяся с мелко — и крупнокапельной жировой дистрофией печёночных клеток. Окраска: гематоксилин-эозин.

Рис. 23. Гигантоклеточный гепатит. Неравномерное полнокровие синусоидных капилляров. Белковая зернистая дистрофия, признаки неравномерно выраженной их регенерации в виде деления ядер и самих клеток. Диффузно в срезах в большом количестве расположены гигантские многоядерные макрофаги.

Препараты предоставлены кафедрой судебной медицины Ижевской ГМА

Рис. 24, 25. Выраженный очагово-диффузный гемосидероз ткани печени. Большое количество клеток Купфера с цитоплазмой, нагруженной большим количеством буро-коричневого пигмента. Окраска: гематоксилин-эозин. Увеличение х250.

Рис. 26-29. Почка с резко выраженной белковой зернистой дистрофией, гидропической (вплоть до баллонной) дистрофией эпителия канальцев, с некробиозом-некрозом отдельных эпителиоцитов и групп клеток различной величины, атрофией ряда канальцев различной степени выраженности. Наличие в просветах части канальцев свежих ярко-красных эритроцитов (гематурия) и выщелоченных эритроцитов, гиалиновых цилиндров, слущенных эпителиоцитов.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Рис. 30, 31. Выраженный очагово-диффузный гемосидероз селезёнки.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Рис. 32, 33. Светлоклеточный рак почки.

Окраска: гематоксилин и эозин. Увеличение х250.

Источник

Окраска гематоксилин—эозин

Окраска гематоксилин—эозин (окраска гематоксилином и эозином) является одним из самых распространённых методов гистологии. Широко используется в медицинской диагностики, в частности в онкологии для окраски ткани, полученной при биопсии.

Окраска включает использование основного красителя гематоксилина, окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y, окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом. Базофильные структуры, как правило, это те, которые содержат нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК): клеточное ядро, рибосомы и РНК-богатые участки цитоплазмы. Эозинофильные структуры содержат внутри- и внеклеточные белки, например, тельца Леви. Цитоплазма является эозинофильной средой. Эритроциты всегда прокрашиваются ярко-красным цветом.

Таким образом, терминология базофильная и эозинофильная структура связана с аффинностью к соответствующим красителям и не связана с кислотностью среды.

Некоторые структуры плохо прокрашиваются гематоксилином и эозином (как правило гидрофобные) и требуют иных методов окраски. Например, участки клеток, богатые липидами и миелином остаются неокрашенными: адипоциты, миелиновая оболочка аксонов нейронов, мембрана аппарата Гольджи и др.

Смотреть что такое «Окраска гематоксилин—эозин» в других словарях:

Гематоксилин — Общие Систематическое наименование цис (+) 7,​11b ​дигидробенз[b]индено​[1, 2 d]​пиран ​3,​4,​6a,​9,​10(6H) ​пентол Химическ … Википедия

Эозин Y — Общие Систематическое наименование 2 (2,4,5,7 тетрабромо 6 оксидо 3 окс … Википедия

Эозин — Y … Википедия

ОКРАСКА — (микроорганизмов). Мазок на предметном или покровном стекле высушивается на воздухе; высушивание над пламенем не рекомендуется, допускается лишь помещение препарата вблизи пламени. Высушенный препарат фиксируется троекратным проведением через… … Большая медицинская энциклопедия

Кожа — У этого термина существуют и другие значения, см. Кожа (значения). О коже как материале см. Кожевенное производство, Кожаные изделия, Художественная обработка кожи. Кожа наружный покров организма позвоночных, защищающий тело от широкого… … Википедия

Радиальная глия — … Википедия

Список паразитов человека — Паразиты человека это паразиты, заражению которыми подвержен человек. Общее определение слова «паразит» касается не только многоклеточных и простейших, живущих за счёт своего хозяина и во вред последнему, но также вирусов, бактерий и грибов … Википедия

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА — ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА. Содержание: Методика гистологич. исследований. 242 Теоретические основы Г. т. 246 Гистохимия. 253 Краски, употребляемые в Г. т. 258 Гистологическая техник а техника изучения… … Большая медицинская энциклопедия

КРАСКИ — КРАСКИ, химич. вещества, обладающие свойством окрашивать другие предметы в свой или другой цвет непосредственно или с помощью другого хим. соединения протравы. Широкое применение К., надо полагать, вызывается инстинктивным стремле нием человека к … Большая медицинская энциклопедия

Источник

Окраска гематоксилин-эозин

Окраска ГЭ — это обязательный этап для любого гистологического исследования. По препаратам, окрашенным этим методом, можно поставить большинство гистологических диагнозов, увидеть основные структуры и составляющие исследуемого объекта.

Прежде чем окрасить препарат, нужно сначала высушить его и обезводить.

Высушивание стекла с парафиновым срезом

— выловить срез на стекло и оставить при комнатной температуре до утра

— вертикально высушить срез на стекле в термостате 60оС в
течение 1 часа

— поместить для сушки в нагревательный отсек стейнера

— поместить срез в водяную баню, выловить на стекло и
подогреть над пламенем спиртовки (или феном)

— горизонтально подогреть на нагревательном столике.

После того, как срез высушен, можно приступить к окраске.

Общие этапы для удаления парафина перед окраской. Депарафинирование

Депарафинирование должно осуществляться при температуре не ниже 20оС, иначе парафин очень плохо удаляется из срезов и блокирует участки, подлежащие окрашиванию.

Окраска

Гематоксилин

Бывает 2 типов: прогрессивный, который не требует последующего
извлечения избытка красителя, и регрессивный, который красит избытком красителся с последующей его отмывкой.

Прогрессивный окрашивает от 3 и до 20 минут (в зависимости
от длительности использования и чистоты красителя).
Регрессивный до 10 сек и до 5 минут (можно дольше).

После каждого красителя применяют проточную воду 1-5-10
минут (выполняет роль подсинивающего буфера).
После регрессивного гематоксилина ставится проточная вода на 1 мин,
далее — дифференцирующие растворы (солянокислый спирт
0.25-1% на 70-96% этаноле или 0.25-0.5% водная соляная
кислота). Количество погружений стекол в раствор
устанавливается опытным путем с последующим контролем
под микроскопом. После — промывка в 2 сменах проточной
воды по 1 минуте в каждой, затем третья смена проточной
воды от 3 мин и более, до того, как все ядра клеток станут
синими.

Необходимо фильтровать любой гематоксилин после работы и доливать до уровня свежим.

Подсинивание можно выполнять с помощью подсинивающих
растворов.

— промывочный буфер для ИГХ (PBST или TBST)

— мраморная крошка в проточной воде.

Менее эффективные подсинивающие агенты — раствор аммиака или пары аммиака. При обработке этими реактивами срезы могут слезть со стёкол.

Далее стекла помещают в дистиллированную или
деоинзированную воду. Лучше сделать 2 смены по 2 минуты, чтобы
удалить остатки подсинивающих буферов — они извлекают
окраску эозином.

Окраска эозином возможна красителями, содержащими разный
процент эозина на основе спирта, воды или вода+спирт (оптимальный вариант).

Время окраски эозином от 10 сек до 3 мин. После стекла переносят в
дистиллированную воду для отмывки избытка эозина или в спирт, если используется спиртовой раствор красителя.

Избыток эозина можно отмыть опусканием стекла последовательно в
спирт-воду-спирт до тех пор, пока не будет достигнут
желаемый оттенок. При этом нужно помнить, что последующими
спиртами может быть извлечено еще какое-то количество
эозина. Длительность этапов отмывки определяется экспериментально и контролируется визуально под микроскопом.

Эозин, как и гематоксилин, необходимо ежедневно фильтровать, доливая до уровня свежим раствором.

Обезвоживание. После эозина идут 3-4 смены этанола или изопропанола по 2 мин каждая. Первая смена выливается через 60-8-100 стекол, или при помутнении. Остальные переставляются на одну позицию влево, так, чтобы последняя получилась свежая.

Просветление. Происходит посредством 2 смен ксилола по 1 минуте.
Карбол-ксилол совершенно лишний в этом процессе при
условии своевременной замены реактивов.

Протоколы окраски ГЭ

Ручной протокол

Ксилол 3 мин
Ксилол 3 мин
Ксилол 3 мин
Этанол (ИПА) 2 мин
Этанол (ИПА) 2 мин
Этанол (ИПА) 2 мин

Дистиллированная вода 2 мин

Гематоксилин 3-20 мин (в зависимости от типа)

Проточная вода 2 мин

Дифференцирующий раствор 10 сек — 1 мин (для регрессивного; время зависит от типа раствора)

Проточная вода 3-5 мин или
подсинивающий раствор
(можно дольше — до синих ядер)

Дистиллированная вода 2 смены по 2 мин

Эозин 10 сек — 3мин

Дистиллированная вода 1 минута или дольше

Этанол (ИПА) 3 мин
Этанол (ИПА) 3 мин
Этанол (ИПА) 3 мин
Этанол (ИПА) 3 мин
Ксилол 1 минута
Ксилол 1 минута (или дольше, если необходимо).

Общее время процесса: 44 мин — 60 мин.

Для окраски в стейнерах протокол может быть похожим, но не каждый стейнер имеет столько станций для реагентов. Иногда полностью соблюсти вышеописанный протокол не представляется возможным, поэтому приходится жертвовать этапами с дистиллированной водой и дифференцировкой, а также сокращать этапы с этанолом и ксилолом. В этом случае необходимо чаще менять ксилолы и спирты, а также красители, т.к. увеличивается их расход, что, кстати, влияет на себестоимость исследования.

Очень желательно на рабочем месте для окраски иметь работоспособный микроскоп с малым увеличением (10х).

Контролируйте вашу окраску перед подачей стекол патологам!

Источник

Окраска гематоксилином и эозином

Окраска гематоксилином и эозином (окраска гематоксилин-эозином) — один из самых распространённых методов окраски в гистологии. Широко используется в медицинской диагностике, в частности в онкологии для окраски ткани, полученной при биопсии.

Окраска включает использование основного красителя гематоксилина, окрашивающего базофильные клеточные структуры ярко-синим цветом, и спиртового кислого красителя эозина Y, окрашивающего эозинофильные структуры клетки красно-розовым цветом. Базофильные структуры, как правило, это те, которые содержат нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК): клеточное ядро, рибосомы и РНК-богатые участки цитоплазмы. Эозинофильные структуры содержат внутри- и внеклеточные белки, например, тельца Леви. Цитоплазма является эозинофильной средой. Эритроциты всегда прокрашиваются ярко-красным цветом.

Техника окраски гематоксилин-эозином

Некоторые структуры плохо прокрашиваются гематоксилином и эозином (как правило гидрофобные) и требуют иных методов окраски. Например, участки клеток, богатые липидами и миелином, остаются неокрашенными: адипоциты, миелиновая оболочка аксонов нейронов, мембрана аппарата Гольджи и др.

См. также

Ссылки

Полезное

Смотреть что такое «Окраска гематоксилином и эозином» в других словарях:

Окраска гематоксилин—эозин — Гистологический образец лёгочной ткани человека, окрашенный гематоксилин эозином. Окраска гематоксилин эозин (окраска гематоксилином и эозином) является одним из самых распространённых методов гистологии. Широко используется в медицинской… … Википедия

Туберкулёз о́рганов дыха́ния — Туберкулез органов дыхания. Органы дыхания при туберкулезе (Туберкулёз органов дыхания) поражаются наиболее часто. В соответствии с принятой в нашей стране клинической классификацией туберкулеза различают следующие формы Т. о. д.: первичный… … Медицинская энциклопедия

Сердце — I Сердце Сердце (лат. соr, греч. cardia) полый фиброзно мышечный орган, который, функционируя как насос, обеспечивает движение крови а системе кровообращения. Анатомия Сердце находится в переднем средостении (Средостение) в Перикарде между… … Медицинская энциклопедия

Лейко́зы — (leucoscs; греч. leukos белый + ōsis; синоним лейкемия) заболевания опухолевой природы, протекающие с вытеснением нормальных ростков кроветворения: опухоль возникает из кроветворных клеток костного мозга. Заболеваемость Л. неодинакова в различных … Медицинская энциклопедия

Пневмония — I Пневмония (pneumonia; греч. pneumon легкое) инфекционное воспаление легочной ткани, поражающее все структуры легких с обязательным вовлечением альвеол. Неинфекционные воспалительные процессы в легочной ткани, возникающие под влиянием вредных… … Медицинская энциклопедия

Туберкулёз внелёгочный — Туберкулез внелегочный условное понятие, объединяющее формы туберкулеза любой локализации, кроме легких и других органов дыхания. В соответствии с клинической классификацией туберкулеза (Туберкулёз), принятой в нашей стране, к Т. в. относят… … Медицинская энциклопедия

Плацента — I Плацента (лат. placenta лепешка; синоним детское место) развивающийся в полости матки во время беременности орган, осуществляющий связь между организмом матери и плодом. В плаценте происходят сложные биологические процессы, обеспечивающие… … Медицинская энциклопедия

Забрюшинное пространство — I Забрюшинное пространство (spatium retroperitoneale; синоним ретроперитонеальное пространство) клетчаточное пространство, расположенное между задней частью париетальной брюшины и внутрибрюшной фасцией; простирается от диафрагмы до малого таза. В … Медицинская энциклопедия

Матка — I Матка Матка (uterus, metra) непарный мышечный полый орган, в котором происходят имплантация и развитие зародыша; расположен в полости малого таза женщины. Органогенез Развитие М. во внутриутробном периоде начинается при длине плода около 65 мм … Медицинская энциклопедия

Мокрота — I Мокрота (sputum) выделяемый при отхаркивании патологически измененный трахеобронхиальный секрет с примесью слюны и секрета слизистой оболочки носа и придаточных (околоносовых) пазух. В норме трахеобронхиальный секрет состоит из слизи,… … Медицинская энциклопедия

Источник